小鼠羧化不全骨鈣素（ucOC）ELISA試劑盒操作流程

小鼠羧化不全骨鈣素（ucOC）ELISA試劑盒操作流程：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

為了減小過失，是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶所遇到的疑問，我公司技術(shù)人員是這樣說明的：
1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的過失，后者只需移液過失。
2. 一般都是稀釋一次，分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。
3. 由于是從同一原液稀釋，一般不考慮稀釋過失(稀釋過失是存在的)，都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是逐個(gè)稀釋，這樣可以使稀釋過失減小)。
4. 復(fù)孔是為了掃除移液體積，板的影響，以及其他系統(tǒng)過失的，要求復(fù)孔的濃度是一起的。稀釋后分孔能滿意此要求，逐個(gè)稀釋不能。